0,1 ppb Zestawy do testowania mikotoksyn zearalenonu do kukurydzy paszowej 96 studzienek / zestaw

Zestaw testowy Zearalenone ELISA do kukurydzy paszowej 96 studzienek/zestaw Czułość 0,1 ppb

 

1. Zasada

Ten zestaw testowy jest oparty na kompetycyjnym teście immunoenzymatycznym do wykrywania zearalenonu.Antygen sprzęgający jest wstępnie powlekany na paskach mikrostudzienek.Zearalenon w próbce i antygeny sprzęgające wstępnie pokryte na paskach mikrostudzienek konkurują o przeciwciała przeciwko zearalenonowi.Po dodaniu koniugatu enzymu dodaje się substrat TMB w celu zabarwienia.Wartość gęstości optycznej (OD) próbki wykazuje ujemną korelację z zearalenonem w próbce.Wartość tę porównuje się z krzywą standardową, a następnie otrzymuje się reszty zearalenonu.

2. Specyfikacje techniczne

Czułość: 0,1 ppb
Temperatura inkubatora: 25 ℃
Czas inkubatora: 30min～15min

Granica wykrywalności:
Pasza 10ppb
Ryż, Kukurydza, Orzeszki Ziemne 5ppb

Wskaźnik reakcji krzyżowej:
Zearalenon 100%

Wskaźnik odzysku:
Pasza, ryż, orzeszki ziemne, kukurydza 100 ± 30%

3. Komponenty

 

 

1	Paski z mikrodołkami	12 pasków z 8 wyjmowanymi studzienkami każdy
2	6× roztwór wzorcowy (po 1 ml)	0 ppb	0,1 ppb
		0,3 ppb	0,9 ppb
		2,7 ppb	8,1 ppb
3	Koniugat enzymatyczny	7 ml	czerwona czapka
4	Roztwór roboczy przeciwciał	7 ml	niebieska czapka
5	Podłoże A	7 ml	Biała czapka
6	Podłoże B	7 ml	czarna czapka
7	Zatrzymaj rozwiązanie	7 ml	żółta czapka
8	20X skoncentrowany bufor do płukania	40 ml	Biała czapka
9	2X stężony roztwór do ponownego rozpuszczania	50 ml	przezroczysta czapka

 

4. Materiały wymagane, ale niedostarczone

1) Wyposażenie: Czytnik ELISA (450 nm/630 nm), homogenizator, wytrząsarka, wirówka, waga: czułe na ilość 0,01 g, urządzenie do suszenia azotem, inkubator, pipety miarowe, drukarka
2) Mikropipety: jednokanałowe 20l ~ 200l, 100l ~ 1000l, wielokanałowe 30～300 μl
3) Odczynniki: metanol, n-heksan.

5. Wstępna obróbka próbki

Instrukcje (przed obróbką wstępną należy zapoznać się z poniższymi punktami)
1) Do eksperymentów można używać tylko jednorazowych końcówek, które należy wymieniać, gdy są używane do pochłaniania różnych odczynników;
2) Przed eksperymentem każde naczynie doświadczalne musi być czyste i powinno zostać ponownie wyczyszczone, jeśli to konieczne, aby uniknąć zanieczyszczenia, które zakłóca wyniki eksperymentu.

Przygotowanie roztworu przed wstępną obróbką próbki:
Rozwiązanie nr1: Ponowne rozpuszczanie próbki
Dwukrotnie stężony roztwór do ponownego rozpuszczania jest rozcieńczany wodą dejonizowaną w stosunku 1:1 (1 część stężonego roztworu do ponownego rozpuszczania + 1 część wody dejonizowanej), stosowany do ponownego rozpuszczania próbki.
Rozwiązanie nr2: Przykładowy roztwór ekstraktu
7 części metanolu + 3 części wody dejonizowanej w celu uzyskania gotowego do użycia roztworu ekstraktu próbki.

Przygotowanie próbek
5.1 Przygotowanie próbki paszy
1) Weź 1,0 ± 0,05 g zmielonej próbki paszy do 50 ml probówki wirówki, dodaj 5 ml roztworu ekstraktu próbki;
2) Wstrząsaj całkowicie przez 3 min (lub potrząśnij ręcznie przez ponad 5 min), wiruj z prędkością powyżej 4000r/min w 20 ℃ przez 10 min;
3) Weź 50ul supernatantu (warstwa górna), dodaj 950ul próbki do ponownego rozpuszczenia, wytrząsaj równomiernie;
4) Weź 50 μl do testu
Współczynnik rozcieńczenia: 100
Uwaga: jeśli stężenie pozostałości leku w próbce jest poza zakresem krzywej, próbkę można dalej rozcieńczyć do badania (na przykład: pobrać 50ul supernatantu (warstwa górna) do nowej probówki wirówki, dodać 1450ul wody dejonizowanej, współczynnik rozcieńczenia wynosi 150 ).

5.2 Przygotowanie próbki kukurydzy, ryżu
1) Pobierz 1,0 ± 0,05 g zmielonej próbki do 50 ml probówki wirówki;dodać 5 ml roztworu ekstraktu próbki;
2) Wstrząsaj całkowicie przez 3 min (lub potrząśnij ręcznie przez ponad 5 min), wiruj z prędkością powyżej 4000r/min w 20 ℃ przez 10 min;
3) Weź 100ul supernatantu (warstwa górna), dodaj 900ul próbki do ponownego rozpuszczenia, wstrząsaj równomiernie;
4) Weź 50 μl do testu
Współczynnik rozcieńczenia: 50
Uwaga: Jeśli stężenie pozostałości leku w próbce jest poza zakresem krzywej, próbkę można dalej rozcieńczyć do badania (na przykład: weź 50ul supernatantu (warstwa górna) do nowej probówki wirówki, dodaj 950 wody dejonizowanej, współczynnik rozcieńczenia wynosi 100).

5.3 Przygotowanie próbki orzeszków ziemnych
1) Pobierz 1,0 ± 0,05 g zmielonej próbki orzeszków ziemnych do 50 ml probówki wirówkowej;dodać 5 ml roztworu ekstraktu próbki, następnie dodać 4 ml n-heksanu;
2) Wstrząsaj całkowicie przez 3min (lub wstrząsaj ręcznie przez ponad 5min), wiruj z prędkością powyżej 4000r/min w 20℃ przez 10 min;
3) Odrzuć przezroczysty płyn w górnej warstwie, weź 100ul płynu warstwy środkowej, dodaj próbkę 900ul do ponownego rozpuszczenia, wstrząśnij równomiernie;
4) Weź 50 μl do testu
Współczynnik rozcieńczenia: 50
Uwaga: Jeśli stężenie pozostałości leku w próbce jest poza zakresem krzywej, próbkę można dalej rozcieńczyć do testu (na przykład: weź 50ul płynu warstwy środkowej do nowej probówki wirówki, dodaj 950 wody dejonizowanej, współczynnik rozcieńczenia wynosi 100 ).

 

6. Procedury ELISA

6.1 Instrukcje
1. Przed użyciem doprowadzić odczynniki ELISA do temperatury pokojowej (20–25 °C).
2. Umieść odczynniki ELISA z powrotem do 2-8 ℃ natychmiast po użyciu
3. Powtarzalność testu ELISA w procesie analizy w dużej mierze zależy od konsystencji płytki do płukania, poprawna praca płytki do płukania jest punktem oceny Program ELISA
4. We wszystkich procesach inkubacji w stałej temperaturze należy unikać ekspozycji na światło, uszczelnić mikropłytkę membraną osłaniającą.

6.2 Procedury operacyjne

1. Umieść zestaw w temperaturze pokojowej (20-25°C) na co najmniej 30 minut, pamiętając, że każdy odczynnik musi być dobrze wstrząśnięty przed użyciem;
2. Umieść pożądane paski z mikrostudzienkami w ramie płytki.Niezużyte mikropłytki należy ponownie zamknąć i przechowywać w temperaturze 2-8°C, nie zamrażać.
3. Przygotowanie roztworu: Weź 40ml 20x stężonego buforu do płukania i rozpuść go w dejonizowanej wodzie w stosunku 1:19 (1 część 20x stężonego buforu do płukania + 19 części dejonizowanej wody) lub przygotuj według potrzeb.
4. Numeracja: Ponumeruj mikrostudzienki zgodnie z próbkami i roztworami wzorcowymi;każda próbka i roztwór wzorcowy powinny być wykonane w dwóch egzemplarzach;zapisują swoje pozycje.
5. Dodać wzorzec/próbkę: Dodać 50 µl próbki lub roztworu wzorcowego do oddzielnych podwójnych studzienek, następnie dodać koniugat enzymu, 50 µl/studzienkę;następnie roztwór roboczy przeciwciała, 50 µl/studzienkę.Delikatnie wymieszać przez ręczne potrząsanie płytką, zamknąć mikropłytkę folią nakrywkową i inkubować w temperaturze 25°C przez 30 min w ciemności.
6. Umyć mikropłytkę: Ostrożnie otworzyć folię przykrywającą i wlać płyn do mikrostudzienki;dodać 250 µl/studzienkę buforu do płukania, dokładnie przemyć 4-5 razy po 15-30 s za każdym razem, następnie usunąć papierem chłonnym Pat Dry.(Po wyschnięciu nakłuć pęcherzyki powietrza nieużywaną włócznią)
7. Wywoływanie koloru: Dodaj 50 µL roztworu Substrate A do każdego dołka, a następnie 50 µL Roztworu B. Delikatnie wymieszaj przez ręczne potrząsanie płytką i inkubuj przez 15 min w 25 °C w ciemności w celu wybarwienia.
8. Test: Do każdego dołka dodać 50 µl roztworu zatrzymującego reakcję.Delikatnie wymieszaj, potrząsając płytką ręką.Ustaw długość fali czytnika mikropłytek na 450 nm, aby określić wartość OD każdego dołka.(Zaleca się odczytywanie wartości OD przy dwóch długościach fali 450/630 nm w ciągu 5 minut).

 

7. Ocena wyniku

Istnieją dwie metody oceny wyników;pierwszy to osąd zgrubny, drugi to określenie ilościowe.Zauważ, że wartość OD próbki ma ujemną korelację z zearalenonem w próbce
7.1 Ocena jakościowa
Zakres stężeń (ppb) można uzyskać porównując średnią wartość absorbancji ze standardami.Załóżmy, że wartość absorbancji próbki pierwszej wynosi 0,3, próbki drugiej 1,0, a standardy to: 0 ppb 2,243;0,1 ppb z 1,816;0,3 ppb z 1,415;0,9 ppb 0,74;2,7 ppb 0,313;8,1 ppb z 0,155.Wtedy stężenie próbki 1 mieści się w zakresie 2,7 ppb ~ 8,1 ppb;Próbka druga to 0,3 ppb ~ 0,9 ppb.Zakres stężeń zearalenonu w próbkach można uzyskać mnożąc przez odpowiednie rozcieńczenie próbki.
7. 2 Analiza ilościowa
W celu obliczenia stężenia próbek należy wykonać krzywą standardową.Przed wykonaniem krzywej wzorcowej należy znać pojęcie % absorbancji.
Obliczanie % absorbancji:

 

Procent wartości absorbancji =	B	×100%
	B0

B — średnia wartość OD próbki lub roztworu wzorcowego
B0 — średnia wartość OD roztworu wzorcowego 0 ng/mL
W ten sposób norma zerowa jest równa 100 %, a wartości absorbancji są podawane w procentach.Wartości obliczone dla wzorców są wprowadzane w układzie współrzędnych na półlogarytmicznym papierze milimetrowym w funkcji stężenia zearalenonu [ng/mL].Z krzywej kalibracji można odczytać stężenie zearalenonu w ng/ml odpowiadające absorbancji każdej próbki.
Specjalne oprogramowanie do analizy wyników testu ELISA ułatwi podwójne lub wielokrotne oznaczenia.Jeśli potrzebujesz, zadzwoń, aby poprosić.

8. Środki ostrożności

1. Temperatura pokojowa poniżej 25 ℃ lub temperatura odczynników i próbek, które nie zostały przywrócone do temperatury pokojowej (20-25 ℃) doprowadzą do niższej standardowej wartości OD.
2. Suchości mikropłytki w procesie mycia będą towarzyszyć sytuacje obejmujące nieliniowe krzywe wzorcowe i niepożądaną odtwarzalność;Więc przejdź do następnego kroku natychmiast po umyciu.
3. Wymieszać równomiernie przed dodaniem jakichkolwiek odczynników.
4. Roztwór zatrzymujący to 2 M roztwór kwasu siarkowego, unikaj kontaktu ze skórą.
5. Nie używać zestawu po upływie terminu ważności.Użycie rozcieńczonych lub zafałszowanych odczynników z zestawów spowoduje zmiany czułości i wykrywanych wartości OD.Nie należy wymieniać odczynników z zestawów o różnych numerach serii, które mają być używane.
6. Przechowywanie: przechowywać w temperaturze 2-8 ℃, nie zamrażać.Włóż niewykorzystaną mikropłytkę do samouszczelniającego się worka, aby ponownie ją zamknąć.Substancja standardowa i bezbarwna substancja barwiąca są wrażliwe na światło, a zatem nie mogą być bezpośrednio wystawione na działanie światła.
7. Wyrzuć roztwór barwiący o dowolnym kolorze, który wskazuje na degenerację tego roztworu.Wartość wykrywania (450/630nm) roztworu wzorcowego 0 (0 ppb) mniejsza niż 0,5((A450nm<0,5)) wskazuje na jego degenerację.
8. Optymalna temperatura reakcji to 25 ℃, a zbyt wysoka lub zbyt niska temperatura spowoduje zmiany czułości wykrywania i wartości OD.

9. Przechowywanie i data ważności

Przechowywanie: przechowywać w temperaturze 2-8 ℃, nie zamrażać.
Termin ważności: 12 miesięcy;data produkcji znajduje się na pudełku.
Uwaga: Jeśli opakowanie próżniowe mikropłytki przecieka, nadal można go używać, nie wpływaj na wynik testu, zrelaksuj się podczas użytkowania.

 

 

 

 

 

 

 

P1: Kiedy zostanie wysłany?
A1: Wyślemy towar tak szybko, jak to możliwe w ciągu 7 dni roboczych od otrzymania płatności.(W przypadku czynników zewnętrznych, takich jak epidemia, dostawa może się opóźnić)

 

P2: czy obsługuje OEM/ODM?
A2: Może być obsługiwany, ale określona ilość musi przekraczać 100 000 sztuk, co jest wygodne w przypadku niestandardowych produktów.

 

P3: Jak radzi sobie twoja fabryka pod względem kontroli jakości?
A3: Posiadamy krajowe certyfikaty ISO9001 i ISO13485.Nasz proces produkcyjny jest zgodny ze standardowymi procedurami, aby zapewnić optymalną jakość produktu.

 

P4: Jak zapewnić obsługę posprzedażną?
A4: Zapewniamy profesjonalną techniczną obsługę posprzedażną online.Możemy zapewnić Ci indywidualne wskazówki za pośrednictwem wideo, telefonu itp.

 

P5: Jaka jest metoda płatności?
A5: Otrzymujemy płatność przez T / T.

 

P6: jak wysłać?
A6: Wybierz najlepszą dla siebie metodę wysyłki, otrzymując oferty od naszych wielu współpracujących przewoźników, a także wysyłaj zgodnie z własnymi wymaganiami.