Trichothecenes T-2 Peanut Test Kit ELISA Sprzęt do testowania aflatoksyn do ryżu paszowego 3ppb

Zestaw testowy Trichothecenes (T-2) ELISA do paszy z ryżem orzechowym 96 studzienek/zestaw

 

1. Zasada

Ten zestaw testowy jest oparty na kompetycyjnym teście immunoenzymatycznym do wykrywania trichothecenów (T-2).Antygen sprzęgający jest wstępnie powlekany na paskach mikrostudzienek.Trichoteceny (T-2) w próbce i antygeny sprzęgające wstępnie opłaszczone na paskach mikrostudzienek konkurują o przeciwciała przeciwko trichotecenom (T-2).Po dodaniu koniugatu enzymu dodaje się substrat TMB w celu zabarwienia.Wartość gęstości optycznej (OD) próbki wykazuje ujemną korelację z trichotecenami (T-2) w próbce.Wartość tę porównuje się z krzywą standardową, a następnie otrzymuje się reszty trichotecenów (T-2).

 

2. Specyfikacje techniczne

Czułość: 0,05 ppb
Temperatura inkubatora: 25 ℃
Czas inkubatora: 30min～15min
Granica wykrywalności:
Pasza, orzeszki ziemne, ryż 3ppb
Wskaźnik reakcji krzyżowej:
Trichoteceny (T-2) 100%
Wskaźnik odzysku:
Pasza, ryż 90 ± 25%
Orzechowe 85±25%

 

3. Komponenty

 

1	Paski z mikrodołkami	12 pasków z 8 wyjmowanymi studzienkami każdy
2	6× roztwór wzorcowy (po 1 ml)	0ppb	0,05 ppb
		0,15ppb	0,45 ppb
		1,35 ppb	4,05 ppb
3	Koniugat enzymatyczny	7ml	czerwona czapka
4	Roztwór roboczy przeciwciał	7ml	niebieska czapka
5	Podłoże A	7ml	Biała czapka
6	Podłoże B	7ml	czarna czapka
7	Zatrzymaj rozwiązanie	7ml	żółta czapka
8	20× skoncentrowany bufor do płukania	15ml	Biała czapka
9	5× stężony roztwór do ponownego rozpuszczania	50 ml * 2	przezroczysta czapka

 

4. Materiały wymagane, ale niedostarczone

1) Wyposażenie: Czytnik ELISA (450 nm/630 nm), homogenizator, wytrząsarka, wirówka, waga: czułe na ilość 0,01 g, urządzenie do suszenia azotem, inkubator, pipety miarowe, drukarka
2) Mikropipety: jednokanałowe 20ml ~ 200ml, 100ml ~ 1000ml, wielokanałowe 30～300 μl
3) Odczynniki: metanol.

5. Wstępna obróbka próbki

Instrukcje (przed obróbką wstępną należy zapoznać się z poniższymi punktami)
1) Do eksperymentów można używać tylko jednorazowych końcówek, które należy wymieniać, gdy są używane do pochłaniania różnych odczynników;
2) Przed eksperymentem każde naczynie doświadczalne musi być czyste i powinno zostać ponownie wyczyszczone, jeśli to konieczne, aby uniknąć zanieczyszczenia, które zakłóca wyniki eksperymentu.

Przygotowanie roztworu przed wstępną obróbką próbki:
1) Roztwór do ponownego rozpuszczania próbki
Użyć 1 części (5X) stężonego roztworu do ponownego rozpuszczania i rozpuścić w 4 częściach wody dejonizowanej, aby otrzymać gotowy do użycia roztwór do ponownego rozpuszczania próbki.
2) Przykładowy roztwór ekstraktu
Użyć 1 części metanolu i rozpuścić w 1 części roztworu do ponownego rozpuszczania próbki, aby otrzymać gotowy do użycia roztwór ekstraktu próbki.
Przygotowanie paszy, orzeszków ziemnych, próbki ryżu

1) Weź 1,0 ± 0,05 g zmielonej próbki do 50 ml probówki wirówki, dodaj 5 ml roztworu ekstraktu próbki, wytrząsaj przez 3 min, wiruj przy ponad 4000 obr/min w 20 ℃ przez 10 min;
2) Weź 100ul supernatantu (warstwa górna), dodaj 400ul próbki roztworu do ponownego rozpuszczania, wytrząsaj równomiernie;
3) Weź 50 μl do testu
Współczynnik rozcieńczenia: 25

 

6. Procedury ELISA

6.1 Instrukcje

1)Przed użyciem doprowadzić odczynniki ELISA do temperatury pokojowej (20–25 °C).
2)Umieść odczynniki ELISA z powrotem do 2-8 ℃ natychmiast po użyciu
3)Odtwarzalność testu ELISA w procesie analizy w dużej mierze zależy od konsystencji płytki do płukania, poprawna praca płytki do płukania jest punktem oceny Program ELISA
4)We wszystkich procesach inkubacji w stałej temperaturze należy unikać ekspozycji na światło, uszczelnić mikropłytkę membraną przykrywającą.

6. 2 Procedury operacyjne

1)Doprowadź zestaw testowy do temperatury pokojowej (20-25 ℃) na co najmniej 30 minut, pamiętaj, że każdy odczynnik musi być równomiernie wstrząsany przed użyciem;
2)Umieścić wymagane paski z mikrodołkami w ramkach płytek.Ponownie uszczelniono niewykorzystaną mikropłytkę, przechowywaną w temperaturze 2-8 ℃, nie zamrożoną.
3)Przygotowanie roztworu: weź 15ml 20x stężonego buforu do płukania, rozpuść w wodzie dejonizowanej w stosunku 1:19 (1 część 20x stężonego buforu do płukania + 19 części wody dejonizowanej) lub przygotuj w razie potrzeby.
4)Numeracja: ponumeruj mikrostudzienki według próbek i roztworu wzorcowego;każdą próbkę i roztwór wzorcowy należy wykonać w dwóch egzemplarzach;zapisują swoje pozycje.
5)Dodać wzorzec/próbkę: Dodać 50 µl próbki lub roztworu wzorcowego do oddzielnych duplikatów studzienek, następnie dodać koniugat enzymu, 50 µl/studzienkę;następnie roztwór roboczy przeciwciała, 50 µl/studzienkę.Delikatnie wymieszać przez ręczne potrząsanie płytką, uszczelnić mikropłytkę membraną przykrywającą, inkubować w temperaturze 25°C przez 30 min w ciemności.
6)Przemyć mikropłytkę: Ostrożnie otworzyć membranę przykrywającą, wylać płyn z mikrostudzienki;dodać 250 µl/dołek buforu do płukania, płukać 4-5 razy, za każdym razem 15-30 s, następnie wyjąć i osuszyć papierem chłonnym.
7)Zabarwienie: dodać 50 µl roztworu substratu A, a następnie 50 µl roztworu B do każdego dołka.Delikatnie wymieszać przez ręczne potrząsanie płytką i inkubować w 25°C przez 15 minut w ciemności w celu zabarwienia.
8)Oznaczanie: dodać 50 µl roztworu zatrzymującego reakcję do każdego dołka.Delikatnie wymieszać przez ręczne potrząsanie płytką.Ustawić długość fali czytnika mikropłytek na 450 nm, aby określić wartość OD każdego dołka.(Zalecamy odczytanie wartości OD przy podwójnej długości fali 450/630 nm w ciągu 5 min).

 

7. Ocena wyniku

Istnieją dwie metody oceny wyników;pierwszy to osąd zgrubny, drugi to określenie ilościowe.Zauważ, że wartość OD próbki ma ujemną korelację z trichotecenami (T-2) w próbce
7.1 Ocena jakościowa
Zakres stężeń (ppb) można uzyskać porównując średnią wartość absorbancji ze standardami.Załóżmy, że wartość absorbancji próbki pierwszej wynosi 0,3, próbki drugiej 1,0, a standardy to: 0 ppb 2,243;0,05 ppb z 1,816;0,15 ppb z 1,415;0,45 ppb 0,74;1,35 ppb z 0,313;4,05 ppb z 0,155.Wtedy stężenie próbki 1 mieści się w zakresie 1,35 ppb ~ 4,05 ppb;Próbka druga to 0,15 ppb ~ 0,45 ppb.Zakres stężeń trichotecenów (T-2) w próbkach można uzyskać mnożąc przez odpowiednie rozcieńczenie próbki.
7. 2 Analiza ilościowa
W celu obliczenia stężenia próbek należy wykonać krzywą standardową.Przed wykonaniem krzywej wzorcowej należy znać pojęcie % absorbancji.
Obliczanie % absorbancji:

 

Procent wartości absorbancji =	B	×100%
	B0

 

B — średnia wartość OD próbki lub roztworu wzorcowego
B0 — średnia wartość OD roztworu wzorcowego 0 ng/mL
W ten sposób norma zerowa jest równa 100 %, a wartości absorbancji są podawane w procentach.Wartości obliczone dla wzorców wprowadza się w układzie współrzędnych na półlogarytmicznym papierze milimetrowym w funkcji stężenia Trichothecenes (T-2) [ng/mL].Z krzywej kalibracji można odczytać stężenie trichotecenów (T-2) w ng/mL odpowiadające absorbancji każdej próbki.
Specjalne oprogramowanie do analizy wyników testu ELISA ułatwi podwójne lub wielokrotne oznaczenia.Jeśli potrzebujesz, zadzwoń, aby poprosić.

 

8. Środki ostrożności
1)Temperatura pokojowa poniżej 25 ℃ lub temperatura odczynników i próbek nie przywróconych do temperatury pokojowej (20-25 ℃) doprowadzi do niższej standardowej wartości OD.
2)Suchości mikropłytki w procesie mycia będą towarzyszyć sytuacje, w tym nieliniowe krzywe wzorcowe i niepożądana odtwarzalność;Więc przejdź do następnego kroku natychmiast po umyciu.
3)Wymieszać równomiernie przed dodaniem jakichkolwiek odczynników.
4)Rozwiązaniem zatrzymującym jest 2 M roztwór kwasu siarkowego, unikaj kontaktu ze skórą.
5)Nie używać zestawu po upływie terminu ważności.Użycie rozcieńczonych lub zafałszowanych odczynników z zestawów spowoduje zmiany czułości i wykrywanych wartości OD.Nie należy wymieniać odczynników z zestawów o różnych numerach serii, które mają być używane.
6)Przechowywanie: przechowywać w temperaturze 2-8 ℃, nie zamrażać.Włóż niewykorzystaną mikropłytkę do samouszczelniającego się worka, aby ponownie ją zamknąć.Substancja standardowa i bezbarwna substancja barwiąca są wrażliwe na światło, a zatem nie mogą być bezpośrednio wystawione na działanie światła.
7)Wyrzuć roztwór barwiący o dowolnym kolorze, który wskazuje na degenerację tego roztworu.Wartość wykrywania (450/630nm) roztworu wzorcowego 0 (0 ppb) mniejsza niż 0,5((A450nm<0,5)) wskazuje na jego degenerację.
8) Optymalna temperatura reakcji to 25℃, a zbyt wysoka lub zbyt niska temperatura spowoduje zmiany czułości wykrywania i wartości OD.

 

9. Przechowywanie i data ważności
Przechowywanie: przechowywać w temperaturze 2-8 ℃, nie zamrażać.
Termin ważności: 12 miesięcy;data produkcji znajduje się na pudełku.
Uwaga: Jeśli opakowanie próżniowe mikropłytki przecieka, nadal można go używać, nie wpływaj na wynik testu, zrelaksuj się podczas użytkowania.

 

 

 

 

 

 

 

 

P1: Ile czasu zajmie wysyłka?
A1: Zazwyczaj wysyłamy w ciągu 7 dni roboczych.

 

P2: Czy wspierasz OEM/ODM?
A2: może być obsługiwany.Możemy dostosować się do Twoich konkretnych potrzeb i określonych ilości.

 

P3: Jak radzi sobie twoja fabryka pod względem kontroli jakości?
A3: Posiadamy certyfikat ISO9001 i certyfikat ISO13485, do tej pory cały proces produkcji, mamy standardowe zasady, przestrzegamy odpowiednich zachowań i przepisów rządu.

 

P4: Czy gwarantowana jest obsługa posprzedażna?
A4: Zapewniamy profesjonalną techniczną obsługę posprzedażną online.Jeśli produkt ulegnie awarii podczas eksperymentu, możemy zapewnić
indywidualne wskazówki przez telefon, wideo i inne formy.

 

P5: Jaka jest minimalna ilość zamówienia?
A5: 1Kit.

 

P6: Jaka jest metoda wysyłki?
A6: Może być wysyłany ekspresowo (FEDEX, UPS, DHL, EMS itp.) Lub drogą lotniczą i naziemną. Przed złożeniem zamówienia prosimy o potwierdzenie.