30min Aflatoksyny Zestawy do testowania mikotoksyn orzeszków ziemnych Elisa dla tkanki kukurydzianej 96 studzienek / zestaw

Zestaw testowy ELISA na całkowite aflatoksyny dla tkanki kukurydzianej z orzeszkami ziemnymi 96 studzienek/zestaw

 

1.Zestawy do badania mikotoksynZasada

Zestaw ten jest oparty na pośrednim, konkurencyjnym teście immunoenzymatycznym do wykrywania całkowitych aflatoksyn.Sprzężone antygeny są wstępnie powlekane na paskach z mikrostudzienkami.Aflatoksyna w próbce konkuruje ze sprzężonym antygenem wstępnie pokrytym na pasku mikrostudzienek o przeciwciała przeciwko aflatoksynie.Po dodaniu koniugatu enzymu dodaje się substrat TMB do barwienia.Wartość gęstości optycznej (OD) próbki jest ujemnie skorelowana z aflatoksyną w próbce.Wartość tę porównuje się z krzywą standardową, a następnie uzyskuje się poziom resztkowej aflatoksyny.

 

2. Specyfikacje techniczne

Czułość: 0,02 ppb
Temperatura inkubatora: 25 ℃
Czas kultury: 30 minut (15 minut)
Granica wykrywalności:
Pasza, ryż, kukurydza, orzeszki ziemne, bibuła, olej jadalny 2ppb
Współczynnik reakcji krzyżowej:
Aflatoksyna B1 100%
Aflatoksyna M1 91,2%
Aflatoksyna B2 68,4%
Aflatoksyna G1 4,7%
Aflatoksyna G2 2,7%
Wskaźnik odzysku:
Pasza, ryż, kukurydza, orzeszki ziemne, tkanka, olej jadalny 95 ± 35%

 

3. Składniki zestawów do badania mikotoksyn

 

1	Paski z mikrodołkami	12 pasków z 8 wyjmowanymi studzienkami każdy
2	6× roztwór wzorcowy (po 1 ml)	0ppb	0,02ppb
		0,06 ppb	0,18ppb
		0,54ppb	1,62 ppb
3	Koniugat enzymatyczny	7ml	czerwona czapka
4	Roztwór roboczy przeciwciał	7ml	niebieska czapka
5	Podłoże A	7ml	Biała czapka
6	Podłoże B	7ml	czarna czapka
7	Zatrzymaj rozwiązanie	7ml	żółta czapka
8	20× skoncentrowany bufor do płukania	40ml	Biała czapka
9	20× stężony roztwór do ponownego rozpuszczania	50ml	przezroczysta czapka

 

4. Przygotowanie próbki

Instrukcja użytkowania (przed przetwarzaniem wstępnym należy zapoznać się z poniższymi punktami)
1) W eksperymencie można używać wyłącznie jednorazowych końcówek, które należy wymieniać podczas pobierania różnych odczynników;
2) Przed eksperymentem każde naczynie doświadczalne musi zostać wyczyszczone iw razie potrzeby ponownie wyczyszczone, aby uniknąć zanieczyszczenia zakłócającego wyniki eksperymentu.

Przygotowanie roztworu przed wstępną obróbką próbki:
1) Roztwór próbki do rozpuszczania
Użyć 1 części 20X stężonego roztworu do ponownego rozpuszczania i rozpuścić w 19 częściach wody dejonizowanej, aby uzyskać gotowy do użycia roztwór do ponownego rozpuszczania próbki.
2) Ekstrakt próbki
Użyj 7 części metanolu i rozpuść w 3 częściach dejonizowanej wody, aby uzyskać gotowy do użycia ekstrakt próbki.

Przygotowanie próbki
4.1 Przygotowanie próbek tkanek, pasz, ryżu i kukurydzy
1) Umieść 1,0±0,05g zmielonej próbki w 50ml probówce wirówki, dodaj 5ml ekstraktu próbki, wytrząsaj przez 3min, wiruj w 20°C przez 10min powyżej 4000r/min;
2) Weź 100ul supernatantu, dodaj 700ul próbki roztworu do ponownego rozpuszczania, dobrze wstrząśnij;
3) Weź 50 μl do testów
Współczynnik rozcieńczenia: 40

4.2 Przygotowanie próbek oleju jadalnego
1) Pobierz próbkę oleju jadalnego o pojemności 1,0 ± 0,05 g do probówki wirówki o pojemności 50 ml;dodać 5ml ekstraktu próbki, następnie dodać 4ml n-heksanu, wstrząsać przez 3min, wirować przy 4000r/min w 20℃ przez 10min;
2) Odrzucić supernatant, pobrać 100ul roztworu warstwy środkowej, dodać 700ul roztworu do ponownego rozpuszczania próbki i dobrze wstrząsnąć;
3) Weź 50 μl do testów
Współczynnik rozcieńczenia: 40

4.3 Przygotowanie próbek orzeszków ziemnych
1) Umieść 1,0 ± 0,05 g pokruszonej próbki orzeszków ziemnych w 50 ml probówce wirówkowej;dodać 5ml ekstraktu próbki, następnie dodać 4ml n-heksanu, wstrząsać przez 3min, wirować przy 4000r/min powyżej 20℃ przez 10min;
2) Odrzucić supernatant, pobrać 100ul roztworu warstwy środkowej, dodać 400ul roztworu do ponownego rozpuszczania próbki i dobrze wstrząsnąć;
3) Weź 50 μl do testów
Współczynnik rozcieńczenia: 25

 

5. Procedury ELISA

5.1 Instrukcja użytkowania
1) Przed użyciem doprowadzić odczynniki ELISA do temperatury pokojowej (20–25 °C).
2) Natychmiast po użyciu umieść odczynnik ELISA z powrotem w temperaturze 2-8°C.
3) Powtarzalność procesu analizy ELISA w dużej mierze zależy od konsystencji płukania płytek, a prawidłowa operacja płukania płytek jest głównym celem określenia procedury ELISA.
4) Podczas wszystkich procesów inkubacji w stałej temperaturze należy unikać światła i uszczelnić mikropłytkę folią przykrywającą.

5.2 Procedury operacyjne
1)Doprowadź zestaw testowy do temperatury pokojowej (20-25 ℃) na co najmniej 30 minut, pamiętaj, że każdy odczynnik musi być równomiernie wstrząsany przed użyciem;
2)Umieścić wymagane paski z mikrodołkami w ramkach płytek.Ponownie uszczelniono niewykorzystaną mikropłytkę, przechowywaną w temperaturze 2-8 ℃, nie zamrożoną.
3)Przygotowanie roztworu: weź 40ml 20x stężonego buforu do płukania, rozpuść w wodzie dejonizowanej w stosunku 1:19 (1 część 20x stężonego buforu do płukania + 19 części wody dejonizowanej) lub przygotuj według potrzeb.
4)Numeracja: ponumeruj mikrostudzienki według próbek i roztworu wzorcowego;każdą próbkę i roztwór wzorcowy należy wykonać w dwóch egzemplarzach;zapisują swoje pozycje.
5)Dodać wzorzec/próbkę: Dodać 50 µl próbki lub roztworu wzorcowego do oddzielnych duplikatów studzienek, następnie dodać koniugat enzymu, 50 µl/studzienkę;następnie roztwór roboczy przeciwciała, 50 µl/studzienkę.Delikatnie wymieszać przez ręczne potrząsanie płytką, uszczelnić mikropłytkę membraną przykrywającą, inkubować w 25°C przez 30 min w ciemności.
6)Przemyć mikropłytkę: Ostrożnie otworzyć membranę przykrywającą, wylać płyn z mikrostudzienki;dodać 250 µl/dołek buforu do płukania, płukać 4-5 razy, za każdym razem 15-30 s, następnie wyjąć i osuszyć papierem chłonnym.
7)Zabarwienie: dodać 50 µl roztworu substratu A, a następnie 50 µl roztworu B do każdego dołka.Delikatnie wymieszać przez ręczne potrząsanie płytką i inkubować w 25°C przez 15 min w ciemności w celu zabarwienia.
8)Oznaczanie: dodać 50 µl roztworu zatrzymującego reakcję do każdego dołka.Delikatnie wymieszać przez ręczne potrząsanie płytką.Ustawić długość fali czytnika mikropłytek na 450 nm, aby określić wartość OD każdego dołka.(Zalecamy odczytanie wartości OD przy podwójnej długości fali 450/630 nm w ciągu 5 min).

 

6. Ocena wyniku

Istnieją dwie metody oceny wyników;pierwszy to osąd zgrubny, drugi to określenie ilościowe.Należy zauważyć, że wartość OD próbki ma ujemną korelację z całkowitą aflatoksyną w próbce.

6.1 Ocena jakościowa
Zakres stężeń (ppb) można uzyskać porównując średnią wartość absorbancji ze standardami.Załóżmy, że wartość absorbancji próbki pierwszej wynosi 0,3, próbki drugiej 1,0, a standardy to: 0 ppb 2,243;0,02 ppb z 1,816;0,06 ppb 1,415;0,18ppb z 0,74;0,54 ppb z 0,313;1,62 ppb z 0,155.Wówczas stężenie próbki 1 mieści się w zakresie 0,54ppb ~ 1,62ppb;Próbka druga to 0,06 ppb ~ 0,18 ppb.Zakres stężeń całkowitej aflatoksyny w próbkach można uzyskać mnożąc przez odpowiednie rozcieńczenie próbki.

6. 2 Analiza ilościowa
W celu obliczenia stężenia próbek należy wykonać krzywą standardową.Przed wykonaniem krzywej wzorcowej należy znać pojęcie % absorbancji.
Obliczanie % absorbancji:

 

Procent wartości absorbancji =	B	×100%
	B0

 

B — średnia wartość OD próbki lub roztworu wzorcowego.
B0 — średnia wartość OD roztworu wzorcowego 0 ng/mL.
W ten sposób norma zerowa jest równa 100 %, a wartości absorbancji są podawane w procentach.Wartości obliczone dla wzorców są wprowadzane w układzie współrzędnych na półlogarytmicznym papierze milimetrowym w funkcji całkowitego stężenia aflatoksyny [ng/L].Całkowite stężenie aflatoksyny w ng/l (ppb) odpowiadające absorbancji każdej próbki można odczytać z krzywej kalibracji.
Specjalne oprogramowanie do analizy wyników testu ELISA ułatwi podwójne lub wielokrotne oznaczenia.Jeśli potrzebujesz, zadzwoń, aby poprosić.

7. Środki ostrożności

1)Temperatura pokojowa poniżej 25 ℃ lub temperatura odczynników i próbek nie przywróconych do temperatury pokojowej (20-25 ℃) doprowadzi do niższej standardowej wartości OD.
2)Suchości mikropłytki w procesie mycia będą towarzyszyć sytuacje, w tym nieliniowe krzywe wzorcowe i niepożądana odtwarzalność;Więc przejdź do następnego kroku natychmiast po umyciu.
3)Wymieszać równomiernie przed dodaniem jakichkolwiek odczynników.
4)Rozwiązaniem zatrzymującym jest 2 M roztwór kwasu siarkowego, unikaj kontaktu ze skórą.
5)Nie używać zestawu po upływie terminu ważności.Użycie rozcieńczonych lub zafałszowanych odczynników z zestawów spowoduje zmiany czułości i wykrywanych wartości OD.Nie należy wymieniać odczynników z zestawów o różnych numerach serii, które mają być używane.
6)Przechowywanie: przechowywać w temperaturze 2-8 ℃, nie zamrażać.Włóż niewykorzystaną mikropłytkę do samouszczelniającego się worka, aby ponownie ją zamknąć.Substancja standardowa i bezbarwna substancja barwiąca są wrażliwe na światło, a zatem nie mogą być bezpośrednio wystawione na działanie światła.
7)Wyrzuć roztwór barwiący o dowolnym kolorze, który wskazuje na degenerację tego roztworu.Wartość wykrywania (450/630nm) roztworu wzorcowego 0 (0 ppb) mniejsza niż 0,5((A450nm<0,5)) wskazuje na jego degenerację.
8)Optymalna temperatura reakcji to 25 ℃, a zbyt wysoka lub zbyt niska temperatura spowoduje zmiany czułości wykrywania i wartości OD.

8. Przechowywanie i data ważności

Przechowywanie: przechowywać w temperaturze 2-8 ℃, nie zamrażać.
Termin ważności: 12 miesięcy;data produkcji znajduje się na pudełku.
Uwaga: Jeśli opakowanie próżniowe mikropłytki przecieka, nadal można go używać, nie wpływaj na wynik testu, zrelaksuj się podczas użytkowania.

 

 

 

 

 

 

P1: Kiedy zostanie wysłany?
A1: Wyślemy towar tak szybko, jak to możliwe w ciągu 7 dni roboczych od otrzymania płatności.(W przypadku czynników zewnętrznych, takich jak epidemia, dostawa może się opóźnić)

 

P2: czy obsługuje OEM/ODM?
A2: Może być obsługiwany, ale określona ilość musi przekraczać 100 000 sztuk, co jest wygodne w przypadku niestandardowych produktów.

 

P3: Jak radzi sobie twoja fabryka pod względem kontroli jakości?
A3: Posiadamy krajowe certyfikaty ISO9001 i ISO13485.Nasz proces produkcyjny jest zgodny ze standardowymi procedurami, aby zapewnić optymalną jakość produktu.

 

P4: Jak zapewnić obsługę posprzedażną?
A4: Zapewniamy profesjonalną techniczną obsługę posprzedażną online.Możemy zapewnić Ci indywidualne wskazówki za pośrednictwem wideo, telefonu itp.

 

P5: Jaka jest metoda płatności?
A5: Otrzymujemy płatność przez T / T.

 

P6: jak wysłać?
A6: Wybierz najlepszą dla siebie metodę wysyłki, otrzymując oferty od naszych wielu współpracujących przewoźników, a także wysyłaj zgodnie z własnymi wymaganiami.