Zestaw szybkiego testu mykotoksyny ochratoksyny A dla ziarna paszowego o czułości 96 studzienek/zestawu 0,1 Ppb

Zestaw testowy ELISA na ochratoksynę A dla ziarna paszowego 96 studzienek/zestaw Czułość 0,1 ppb

1. Zasada i zastosowanie

Ochratoksyna jest metabolitem wtórnym wytwarzanym przez niektóre gatunki z rodzaju Aspergillus i Penicillium.Wśród nich ochratoksyna A jest najszerzej rozpowszechniona w przyrodzie i ma najsilniejszą toksyczność oraz ma największy wpływ na ludzi, zwierzęta i rośliny.
Zestaw wykorzystuje pośredni kompetycyjny test ELISA do wykrywania ochratoksyn (Ochratoksyny A, OTA) w próbkach zbóż i pasz, takich jak makaron ryżowy, orzeszki ziemne i soja.Zestaw składa się z powlekanej płytki antygenowej i koniugatu enzymu, przeciwciał, standardów i innych odczynników pomocniczych.Podczas testu dodawany jest roztwór wzorca lub próbki, ochratoksyna w próbce i wstępnie powleczony antygen na płytce w celu konkurowania z przeciwciałem ochratoksyny, a po dodaniu koniugatu enzymu, poprzez substrat TMB wykazują kolor, wartości absorbancji próbki wynoszą Ochratoksyna ma ujemną korelację z jej zawartością, w porównaniu z krzywą standardową, a następnie pomnożona przez odpowiedni współczynnik rozcieńczenia, może wyciągnąć zawartość Ochratoksyny w próbkach.

2. Specyfikacje techniczne

Czułość: 0,1 ppb (ng/ml)

Inkubacja: 37 ℃, 30 min ~ 30 min ~ 15 min

Granica wykrywalności:
Ziarno 1ppb
Pasza 2ppb

Wskaźnik reakcji krzyżowej
Ochratoksyna A 100%

Wskaźnik odzysku:
Ziarno, pasza 85±15%

3. Komponenty

4. Materiały wymagane, ale niedostarczone

1) Sprzęt: czytnik ELISA (450nm/630nm), drukarka, wir (opcjonalnie wytrząsarka), wirówka, waga: czułe na ilość 0,01g, pipety miarowe, homogenizator;
2) Mikropipety: jednokanałowe 20ml ~ 200ml, 100ml ~ 1000ml, wielokanałowe 300ml.
3) Odczynniki: metanol, NaHCO3, woda dejonizowana.

5. Wstępna obróbka próbki

5.1 Przygotowanie roztworu przed wstępną obróbką próbki:
1) 70% metanol
7 części metanolu + 3 części dejonizowanej wody;
2) 0,1M roztwór NaHC03
Odważyć 4,2 g NaHCO3, dodać dejonizowaną wodę do rozpuszczenia do 500 ml;
3) Bufor myjący
1 część 20X stężonego buforu myjącego i rozpuścić w 19 częściach dejonizowanej wody, aby otrzymać gotowy do użycia bufor myjący.

5.2 Przygotowanie ziarna (ryż, kukurydza, proso itp.)
1) Odważ 2g jednorodnej próbki do 50ml probówki wirówki, dodaj 10ml 70% metanolu, wytrząsaj przez 5min, wiruj przy 4000 obr/min w temperaturze pokojowej przez 10min;
2) Wziąć 1 ml przezroczystego płynu do warstwy górnej, dodać 1 ml 0,1 M roztworu NaHCO₃, wstrząsnąć równomiernie;
3) Weź 50ul płynu do przetestowania
Współczynnik rozcieńczenia: 10 Granica wykrywania: 1ppb

5.3 Przygotowanie paszy
1) Odważyć 2g jednorodnej próbki do 50ml probówki wirówki, dodać 20ml 70% metanolu, wstrząsać przez 5min, wirować przy 4000 obr/min w temperaturze pokojowej przez 10min;
2) Wziąć 1 ml przezroczystego płynu do warstwy górnej, dodać 1 ml 0,1 M roztworu NaHCO₃, wstrząsnąć równomiernie;
3) Weź 50ul płynu do przetestowania
Współczynnik rozcieńczenia: 20 Granica wykrywania: 2 ppb

6. Procedury ELISA

1) Doprowadzić zestaw testowy do temperatury pokojowej (20-25 ℃) na co najmniej 30 minut, 20X stężony bufor do płukania może wykrystalizować podczas przechowywania w chłodzie, należy powrócić do temperatury pokojowej, aby całkowicie się rozpuścił;pamiętaj, że każdy odczynnik musi być równomiernie wstrząśnięty przed użyciem;Umieścić wymagane paski z mikrodołkami w ramkach płytek.Ponownie uszczelnij nieużywaną mikropłytkę, przechowuj w temperaturze 2-8 ℃, nie zamrażaj.
2) Numeracja: ponumeruj mikrostudzienki według próbek i roztworu wzorcowego;każdą próbkę i roztwór wzorcowy należy wykonać w dwóch egzemplarzach;zapisują swoje pozycje.
3) Dodaj wzorzec/próbkę: Dodaj 50 µl próbki lub roztworu wzorcowego do oddzielnych duplikatów dołków, następnie dodaj roztwór roboczy przeciwciał, 50 µl/dołek.Delikatnie wymieszać przez ręczne potrząsanie płytką, uszczelnić mikropłytkę membraną przykrywającą, inkubować w temperaturze 37℃ przez 30 min w ciemności.
4) Przemyć mikropłytkę: Ostrożnie otworzyć membranę przykrywającą, wylać płyn z mikrostudzienki;dodać 350 µl/studzienkę buforu do płukania, przemyć 5 razy po 30 sekund za każdym razem, następnie wyjąć i osuszyć papierem chłonnym.
5) Dodać koniugat enzymu: dodać koniugat enzymu, 100 µl/studzienkę.Delikatnie wymieszać przez ręczne potrząsanie płytką, uszczelnić mikropłytkę membraną przykrywającą, inkubować w temperaturze 37℃ przez 30 min w ciemności.
Umyć jak w kroku 4).
6) Zabarwienie: dodaj 50 µl substratu A, a następnie 50 µl substratu B do każdego dołka.Delikatnie wymieszać przez ręczne potrząsanie płytką i inkubować w 37 ℃ przez 15 minut w ciemności w celu zabarwienia.(Jeśli kolor niebieski jest zbyt jasny, czas reakcji można odpowiednio wydłużyć)
7) Oznaczanie: dodać 50 µl roztworu zatrzymującego reakcję do każdego dołka.Delikatnie wymieszać przez ręczne potrząsanie płytką.Ustaw długość fali czytnika mikropłytek na 450 nm, aby określić wartość OD każdego dołka.(Zalecamy odczytanie wartości OD przy podwójnej długości fali 450/630nm w ciągu 10 minut).

7. Ocena wyniku

W celu obliczenia stężenia próbek należy wykonać krzywą standardową.Przed wykonaniem krzywej wzorcowej należy znać pojęcie % absorbancji.
Obliczanie % absorbancji:

B — średnia wartość OD próbki lub roztworu wzorcowego.
B0 — średnia wartość OD roztworu wzorcowego 0 ng/mL.
W ten sposób norma zerowa jest równa 100 %, a wartości absorbancji są podawane w procentach.Wartości obliczone dla wzorców są wprowadzane w układzie współrzędnych na półlogarytmicznym papierze milimetrowym w funkcji stężenia ochratoksyny A [μg/kg].Stężenie ochratoksyny A w μg/kg (ppb) odpowiadające absorbancji każdej próbki można odczytać z krzywej kalibracji.
Specjalne oprogramowanie do analizy wyników testu ELISA ułatwi podwójne lub wielokrotne oznaczenia.Jeśli potrzebujesz, zadzwoń, aby poprosić.

8. Środki ostrożności

1) Temperatura pokojowa poniżej 25 ℃ lub temperatura odczynników i próbek, które nie zostaną przywrócone do temperatury pokojowej (25 ℃) doprowadzą do niższej standardowej wartości OD.
2) Suchości mikropłytki w procesie mycia będą towarzyszyć sytuacje obejmujące nieliniowe krzywe wzorcowe i niepożądaną odtwarzalność;więc przejdź do następnego kroku natychmiast po umyciu.
3) Wymieszaj równomiernie przed dodaniem jakichkolwiek odczynników.
4) Roztwór zatrzymujący to 2 M roztwór kwasu siarkowego, unikaj kontaktu ze skórą.
5) Nie używać zestawu po upływie terminu ważności.Użycie rozcieńczonych lub zafałszowanych odczynników z zestawów spowoduje zmiany czułości i wykrywanych wartości OD.Nie należy wymieniać odczynników z zestawów o różnych numerach serii, które mają być używane.
6) Przechowywanie: przechowywać w temperaturze 2-8 ℃, nie zamrażać.Włóż niewykorzystaną mikropłytkę do samouszczelniającego się worka, aby ponownie ją zamknąć.Substancja standardowa i bezbarwna substancja barwiąca są wrażliwe na światło, a zatem nie mogą być bezpośrednio wystawione na działanie światła.
7) Wyrzuć roztwór barwiący o dowolnym kolorze, który wskazuje na degenerację tego roztworu.Wartość wykrywania (450/630nm) roztworu wzorcowego 0 (0 ppb) mniejsza niż 0,5((A450nm<0,5)) wskazuje na jego degenerację.

9. Przechowywanie i data ważności

Przechowywanie: przechowywać w temperaturze 2-8 ℃, nie zamrażać.
Termin ważności: 12 miesięcy;data produkcji znajduje się na pudełku.

P1: Kiedy zostanie wysłany?
A1: Wyślemy towar tak szybko, jak to możliwe w ciągu 7 dni roboczych od otrzymania płatności.(W przypadku czynników zewnętrznych, takich jak epidemia, dostawa może się opóźnić)

P2: czy obsługuje OEM/ODM?
A2: Może być obsługiwany, ale określona ilość musi przekraczać 100 000 sztuk, co jest wygodne w przypadku niestandardowych produktów.

P3: Jak radzi sobie twoja fabryka pod względem kontroli jakości?
A3: Posiadamy krajowe certyfikaty ISO9001 i ISO13485.Nasz proces produkcyjny jest zgodny ze standardowymi procedurami, aby zapewnić optymalną jakość produktu.

P4: Jak zapewnić obsługę posprzedażną?
A4: Zapewniamy profesjonalną techniczną obsługę posprzedażną online.Możemy zapewnić Ci indywidualne wskazówki za pośrednictwem wideo, telefonu itp.

P5: Jaka jest metoda płatności?
A5: Otrzymujemy płatność przez T / T.

P6: jak wysłać?
A6: Wybierz najlepszą dla siebie metodę wysyłki, otrzymując oferty od naszych wielu współpracujących przewoźników, a także wysyłaj zgodnie z własnymi wymaganiami.