Amantadine Diagnostic ELISA Kit dla kaczki wieprzowej z kurczaka 96 studzienek / zestaw Czułość 0,2 Ppb

Amantadyna Zestaw testowy ELISA dla kurczaka Wieprzowina Kaczka 96 dołków / zestaw Czułość 0,2 ppb

 

1. Zasada

Ten zestaw testowy jest oparty na kompetycyjnym teście immunologicznym enzymatycznym do wykrywania amantadyny.Antygen sprzęgający jest wstępnie opłaszczony na paskach mikrostudzienek.Amantadyna w próbce i antygeny sprzęgające wstępnie powleczone na paskach z mikrostudzienkami konkurują o przeciwciała przeciwko amantadynie.Po dodaniu koniugatu enzymu dodaje się substrat TMB w celu zabarwienia.Wartość gęstości optycznej (OD) próbki ma ujemną korelację z amantadyną w próbce.Wartość tę porównuje się z krzywą standardową, a następnie otrzymuje się reszty amantadyny.

 

2. Specyfikacje techniczne

Czułość: 0,2 ppb
Temperatura inkubatora: 25 ℃
Czas inkubacji: 30min ~ 15min

Granica wykrywalności:
Kurczak, kaczka 0,2 ppb

Szybkość reakcji krzyżowych:
Amantadyna 100%

Wskaźnik odzysku:
Kurczak, Kaczka 90±25%

 

3. Komponenty

 

1	Paski mikrodołków	12 pasków z 8 wyjmowanymi dołkami każdy
2	6× roztwór standardowy (każdy po 1 ml)	0 ppb	0,2ppb
		0,8 ppb	3,2 ppb
		12,8 ppb	51,2 ppb
3	Koniugat enzymu	7ml	czerwona czapka
4	Roztwór roboczy przeciwciała	7ml	niebieska czapka
5	Podłoże A	7ml	Biała czapka
6	Podłoże B	7ml	czarna czapka
7	Zatrzymaj rozwiązanie	7ml	żółta czapka
8	Ekstrahent	50ml*2	przezroczysta czapka
9	20× skoncentrowany bufor do płukania	15ml	Biała czapka
10	5× stężony roztwór do ponownego rozpuszczania	10ml	Biała czapka

 

4. Materiały wymagane, ale niedostarczone

 

1) Wyposażenie: Czytnik ELISA (450 nm/630 nm), homogenizator, wytrząsarka, wirówka, waga: czuła na ilość 0,01 g, urządzenie do suszenia azotem, inkubator, pipety miarowe, drukarka

2) Mikropipety: jednokanałowe 20 ml ~ 200 ml, 100 ml ~ 1000 ml, wielokanałowe 30 ~ 300 μl

3) Odczynniki: acetonitryl, n-heksan.

 

5. Wstępna obróbka próbki

 

Instrukcje (Przed obróbką wstępną należy zająć się następującymi punktami)

1) Do eksperymentów można używać tylko jednorazowych końcówek, a końcówki należy zmieniać, gdy są używane do absorbowania różnych odczynników;

2) Przed eksperymentem każde naczynie doświadczalne musi być czyste iw razie potrzeby powinno zostać ponownie oczyszczone, aby uniknąć zanieczyszczenia, które zakłóca wyniki doświadczenia.

 

Przygotowanie roztworu przed wstępną obróbką próbki:

1) Roztwór ekstraktu próbki

6 części acetonitrylu + 1 część ekstrahenta w celu uzyskania gotowego do użycia roztworu ekstraktu próbki.

2) Roztwór do ponownego rozpuszczania próbki

Użyć 1 część stężonego roztworu do ponownego rozpuszczania (5X) i rozpuścić w 4 częściach wody dejonizowanej, aby otrzymać gotowy do użycia roztwór do ponownego rozpuszczania próbki.

Przygotowanie próbek

 

5.1 Przygotowanie próbki kurczaka, kaczki

1) Wziąć 3,0 ± 0,05 g homogenizowanej próbki tkanki do 50 ml probówki wirówkowej;dodać 6 ml roztworu ekstraktu próbki, wstrząsać przez 3 min, wirować powyżej 4000 obr./min w temperaturze pokojowej (20 - 25 ℃) przez 5 min;

2) Weź 2 ml klarownej fazy organicznej do suchego pojemnika, przedmuchaj do wyschnięcia azotem lub powietrzem w temperaturze 50 ~ 60 ℃;

3) Najpierw dodaj 1 ml n-heksanu, następnie dodaj 0,5 ml roztworu do ponownego rozpuszczania próbki, mieszaj przez 30 sekund, wiruj z prędkością powyżej 4000 obr./min w temperaturze pokojowej (20 - 25 ℃) przez 5 minut, odrzuć n-heksan z górnej warstwy;

4) Weź 50 μl płynu do badania

Współczynnik rozcieńczenia: 0,5

 

6. Procedury ELISA

 

6.1Instrukcje

1. Przed użyciem doprowadzić odczynniki do testu ELISA do temperatury pokojowej (20–25°C).

2. Natychmiast po użyciu odstaw odczynniki ELISA z powrotem do temperatury 2-8 ℃

3. Powtarzalność testu ELISA w procesie analizy zależy w dużej mierze od konsystencji mytej płytki, poprawność działania płytki myjącej jest punktem ustalenia programu ELISA

4. We wszystkich procesach inkubacji w stałej temperaturze, unikaj ekspozycji na światło, zamknij mikropłytkę membraną ochronną

 

6. 2 Procedury operacyjne

1. Doprowadzić zestaw testowy do temperatury pokojowej (20-25 ℃) na co najmniej 30 min, pamiętać, że przed użyciem należy równomiernie wstrząsnąć każdym odczynnikiem;

2. Umieść wymagane paski mikrodołków w ramkach płytek.Ponownie zamknij nieużywaną mikropłytkę, przechowuj w temperaturze 2-8 ℃, nie zamrażaj.

3. Przygotowanie roztworu: rozcieńczyć 15 ml 20-krotnego stężonego buforu do płukania wodą dejonizowaną do 300 ml.

4. Numeracja: ponumerować mikrostudzienki zgodnie z próbkami i roztworem wzorcowym;każdą próbkę i roztwór wzorcowy należy wykonać w dwóch powtórzeniach;zanotować ich pozycje.

5. Dodaj wzorzec/próbkę: Dodaj 50 µl próbki lub roztworu wzorcowego do oddzielnych podwójnych dołków, następnie dodaj koniugat enzymu, 50 µl/dołek;następnie roztwór roboczy przeciwciała, 50 µl/studzienkę.Delikatnie wymieszać poprzez ręczne potrząsanie płytką, uszczelnić mikropłytkę membraną przykrywającą, inkubować w temperaturze 25°C przez 30 min w ciemności.

6. Wymyć mikropłytkę: Ostrożnie otworzyć membranę pokrywy, wylać płyn z mikrostudzienki;dodać 250 µL/dołek rozcieńczonego buforu do płukania, przemyć całkowicie 4-5 razy, za każdym razem po 15-30 s, następnie wyjąć i wytrzeć do wyschnięcia papierem chłonnym.

7. Zabarwienie: dodać 50 µl roztworu substratu A, a następnie 50 µl roztworu B do każdego dołka.Delikatnie wymieszać, ręcznie wstrząsając płytką, i inkubować w temperaturze 25°C przez 15 minut w ciemności w celu zabarwienia.

8. Oznaczanie: dodać 50 µl roztworu zatrzymującego reakcję do każdego dołka.Delikatnie wymieszać, ręcznie potrząsając płytką.Ustaw długość fali czytnika mikropłytek na 450 nm, aby określić wartość OD każdego dołka.(Zaleca się odczytanie wartości OD przy podwójnej długości fali 450/630nm w ciągu 5 minut).

 

7. Ocena wyniku

Istnieją dwie metody oceny wyników;pierwszy to zgrubna ocena, a drugi to określenie ilościowe.Należy zauważyć, że wartość OD próbki ma ujemną korelację z amantadyną w próbce

7.1 Określenie jakościowe
Zakres stężeń (ng/ml) można uzyskać porównując średnią wartość absorbancji z wzorcami.Załóżmy, że wartość absorbancji Próbki Pierwszej wynosi 0,3, Próbki Drugiej wynosi 1,0, a wzorcami są: 0ppb 2,243;0,2 ppb z 2,054;0,8 ppb z 1,715;3,2 ppb z 1,074;12,8 ppb z 0,451;51,2 ppb z 0,155.Wtedy stężenie próbki mieści się w przedziale 12,8ppb ~ 51,2ppb;Próbka druga to 3,2 ppb ~ 12,8 ppb.Zakres stężeń amantadyny w próbkach można uzyskać przez pomnożenie przez odpowiednie rozcieńczenie próbki.
 

7. 2 Analiza ilościowa
W celu obliczenia stężenia próbek należy sporządzić krzywą wzorcową.Przed wykonaniem krzywej wzorcowej należy znać pojęcie % absorbancji.
Obliczenie % absorbancji:

 

Procent wartości absorbancji =	B	×100%
	B0

 

B—średnia wartość OD próbki lub roztworu wzorcowego
B0 — średnia wartość OD roztworu wzorcowego 0 ng/mL
Standard zerowy jest zatem równy 100%, a wartości absorbancji są podawane w procentach.Wartości obliczone dla wzorców wprowadza się w układzie współrzędnych na półlogarytmicznym papierze milimetrowym w stosunku do stężenia amantadyny [ng/ml].Stężenie amantadyny w ng/ml (ppb) odpowiadające absorbancji każdej próbki można odczytać z krzywej kalibracji.
Specjalne oprogramowanie do analizy wyników testu ELISA ułatwi podwójne lub wielokrotne oznaczanie.Jeśli potrzebujesz, zadzwoń, aby poprosić.

 

8. Środki ostrożności

 

1. Standardowa wartość OD będzie niska, jeśli temperatura pokojowa jest niższa niż 25℃ lub temperatura odczynnika, a próbka nie powróciła do temperatury pokojowej (20-25℃).
2. Mikropłytka jest suszona podczas procesu mycia, czemu towarzyszyć będzie nieliniowość krzywej wzorcowej i słaba powtarzalność;dlatego przejdź do następnego kroku natychmiast po praniu.
3. Dobrze wymieszaj przed dodaniem jakichkolwiek odczynników.
4. Roztworem zatrzymującym jest 2M roztwór kwasu siarkowego, unikaj kontaktu ze skórą.
5. Nie używaj zestawu po upływie daty ważności.Użycie rozcieńczonych lub zafałszowanych odczynników z zestawu może spowodować zmiany czułości i wartości OD wykrywania.Nie wymieniać odczynników w różnych partiach zestawów.
6. Przechowywanie: Przechowywać w temperaturze 2-8°C, nie zamrażać.Zamknąć nieużywane mikropłytki w torebkach samouszczelniających.Standardowe materiały i bezbarwne łączniki są wrażliwe na światło i nie mogą być bezpośrednio wystawione na działanie światła.
7. Wyrzuć roztwór barwiący, którego kolor wskazuje na rozkład roztworu.Wartość wykrywania (450/630nm) roztworu wzorcowego 0 (0 ppb) jest mniejsza niż 0,5 ((A450nm<0,5)), co wskazuje na jego denaturację.
8. Optymalna temperatura reakcji to 25℃.Jeśli temperatura jest zbyt wysoka lub zbyt niska, zmieni się czułość wykrywania i wartość OD.

 

9. Przechowywanie i data ważności

Przechowywanie: przechowywać w temperaturze 2-8 ℃, nie zamrażać.
Data ważności: 12 miesięcy;data produkcji jest na pudełku
Uwaga: Jeśli opakowanie próżniowe mikropłytki jest nieszczelne, nadal można go używać, nie wpływa na wynik testu, można go zrelaksować.

 

 

 

 

 

P1: kiedy zostanie wysłane?
A1: Wysyłamy towar tak szybko, jak to możliwe w ciągu 7 dni roboczych po otrzymaniu płatności.(W przypadku czynników zewnętrznych np. epidemii dostawa może się opóźnić)

 

P2: czy obsługuje OEM/ODM?
A2: Może być obsługiwany, ale konkretna ilość musi przekraczać 100 000 sztuk, co jest wygodne w przypadku produktów niestandardowych.

 

P3: Jak radzi sobie Twoja fabryka pod względem kontroli jakości?
A3: Posiadamy krajowe certyfikaty ISO9001 i ISO13485.Nasz proces produkcyjny jest zgodny ze standardowymi procedurami, aby zapewnić optymalną jakość produktu.

 

P4: Jak zapewnić obsługę posprzedażną?
A4: Zapewniamy profesjonalną techniczną obsługę posprzedażną online.Możemy zapewnić indywidualne wskazówki przez wideo, telefon itp.

 

P5: Jaka jest metoda płatności?
A5: Otrzymujemy płatność przez T / T.

 

P6: jak wysłać?
O6: Wybierz najlepszą dla siebie metodę wysyłki, uzyskując wyceny od wielu współpracujących przewoźników, a także wysyłaj zgodnie z własnymi wymaganiami.