Test metody diagnostycznej Olaquindox ELISA dla kaczki wieprzowej z kurczaka 96 studzienek / zestaw Czułość 0,2 Ppb

Zestaw testowy Olaquindox ELISA dla kaczki wieprzowej z kurczaka 96 studzienek/zestaw Czułość 0,2 ppb

1. Zasada

Ten zestaw testowy jest oparty na kompetycyjnym teście immunoenzymatycznym do wykrywania olaquindoksu w próbce.Antygeny sprzęgające są wstępnie powlekane na paskach mikrostudzienek.Olaquindox w próbce i antygeny sprzęgające wstępnie pokryte na paskach mikrostudzienek konkurują o przeciwciało anty-Olaquindox.Po dodaniu koniugatu enzymu dodaje się substrat TMB w celu zabarwienia.Wartość gęstości optycznej (OD) próbki wykazuje ujemną korelację z zawartym w niej Olaquindoxem.Wartość tę porównuje się z krzywą standardową, a następnie uzyskuje się stężenie Olaquindoksu.

2. Specyfikacje techniczne

Czułość: 0,2 ppb
Temperatura inkubatora: 37 ℃
Czas inkubatora: 30min~30min～15min

Granica wykrywalności:
Wieprzowina, kurczak 0,2 ppb
Wątroba wieprzowa 1 ppb
Pasza 20ppb

Wskaźnik reakcji krzyżowej:
Olaquindoks100%
Karbadoks<7%

Wskaźnik odzysku:
Tkanka 95% ± 25%
Podawanie 70% ± 20%

3. Komponenty

4. Materiały wymagane, ale niedostarczone

1) Wyposażenie: czytnik mikropłytek (450 nm/630 nm), homogenizator, oscylator, wirówka, pipety pomiarowe, urządzenie do suszenia azotu i waga (odwrotność czułości 0,01 g), inkubator.
2) Mikropipety: jednokanałowe 20 do 200 µl i 100 do 1000 µl oraz wielokanałowe 30～300 µl;
3) Odczynniki: Acetonitryl, N-heksan, Al2O3

5. Wstępna obróbka próbki

Instrukcje
Przed wstępną obróbką jakiejkolwiek próbki należy uwzględnić następujące punkty:
1) Do eksperymentów można używać tylko jednorazowych końcówek, które należy wymieniać, gdy są używane do pochłaniania różnych odczynników;
2) Przed eksperymentem każde naczynie doświadczalne musi być sprawdzone pod kątem czystości iw razie potrzeby powinno zostać ponownie wyczyszczone, aby uniknąć zanieczyszczenia, które zakłóca wyniki eksperymentu.

przygotowanie próbki
1) Roztwór do ponownego rozpuszczania próbki: Rozcieńczyć 2 × stężony roztwór do ponownego rozpuszczania wodą dejonizowaną w stosunku 1:1

5.1 Tkanki (kurczak, wieprzowina/wątroba)
1. Przenieś 2±0,05g zhomogenizowanej próbki do 50ml probówki wirówki, dodaj 10mLacetonitrylu (bez wody), wytrząsaj prawidłowo przez 2min. Wiruj z prędkością powyżej 4000r/min w temperaturze pokojowej (20-25℃) przez 10min.
2. Weź 5mL supernatantu, przedmuchaj do wyschnięcia azotem lub powietrzem w 56℃.
3. Rozpuścić suchą pozostałość w 2mlN-heksanie, dodać 1mL rozcieńczonego roztworu do ponownego rozpuszczania, dokładnie wymieszać przez 30s, wirować z prędkością powyżej 4000r/min w temperaturze pokojowej (20-25℃) przez 5min.Usunąć górną warstwę fazy N-heksanowej.
4. Weź 50 µl do analizy.
Krotność rozcieńczenia próbki:1

5.2 Kanał
1. Odważyć 1 ± 0,05 g zhomogenizowanej próbki do probówki wirówki, dodać 2 gAl2O3, następnie 5 ml acetonitrylu, wstrząsać gwałtownie przez 3 minuty, wirować przy prędkości powyżej 4000 obr./min przy 25 ℃ przez 5 minut;
2. Weź 50ulsupernatant, wymieszaj równomiernie z 950ul rozcieńczonego roztworu do ponownego rozpuszczania, weź 50µl górnej warstwy płynu do analizy.
Krotność rozcieńczenia próbki: 100

6. Procedury ELISA

6.1 Instrukcje
1) Przed użyciem należy doprowadzić wszystkie odczynniki i paski z mikrostudzienkami do temperatury pokojowej (20-25 ℃);
2) Przywróć wszystkie odczynniki do 2-8 ℃ natychmiast po użyciu;
3) Powtarzalność analizy ELISA w dużym stopniu zależy od konsystencji płukania płytek.Prawidłowe działanie mycia płyt jest kluczowym punktem w procedurach ELISA;
4) W przypadku inkubacji w stałych temperaturach wszystkie próbki i odczynniki muszą unikać ekspozycji na światło, a każda mikropłytka powinna być uszczelniona membraną przykrywającą.

6.2 Procedura obsługi
1) Wyjmij wszystkie wymagane odczynniki i trzymaj w temperaturze pokojowej (20-25℃) przez co najmniej 30min.Należy pamiętać, że każdy odczynnik musi być wstrząsany i dobrze wymieszany przed użyciem;
2) Weź żądany pasek z mikrostudzienkami i ramkę płytki.Niezużyte mikropłytki należy ponownie zamknąć i przechowywać w temperaturze 2-8°C;
3) Przygotowanie roztworu: Rozcieńczyć 40 ml 20x stężonego buforu do płukania wodą dejonizowaną w stosunku 1:19 (1 część 20x stężonego buforu do płukania + 19 części wody dejonizowanej) lub przygotować w razie potrzeby;
4) Numeracja: Ponumeruj mikrostudzienki zgodnie z próbkami i roztworami wzorcowymi;każda próbka i roztwór wzorcowy powinny być wykonane w dwóch egzemplarzach;zapisywać swoje pozycje;
5) Dodaj 50 µl próbki lub roztworu wzorcowego do oddzielnych dołków, a następnie dodaj 50 µl roztworu roboczego przeciwciał do każdego dołka.Delikatnie wstrząsnąć, aby dobrze wymieszać, przykryć mikropłytkę folią przykrywającą i inkubować w 37°C przez 30 min;
6) Przemyj mikropłytkę 4-5 razy 250 µl/studzienkę buforu do płukania;namoczyć dołki w buforze do płukania przez 15-30 sekund i osuszyć papierem chłonnym (jeśli po ostukiwaniu pojawią się pęcherzyki powietrza, odciąć czystą końcówką pipety) );
7) Dodać 100 µl koniugatu enzymu do każdego dołka, wstrząsnąć i delikatnie wymieszać, przykryć mikropłytkę folią przykrywającą i inkubować w 37°C przez 30 min;wylać płyn z dołka, przemyć mikropłytkę buforem do płukania i przejść do kroku 6 ).
8) Wywoływanie koloru: Dodaj 50 µl roztworu substratu A i 50 µl roztworu B do każdego dołka.Delikatnie wstrząsnąć i wymieszać, a następnie inkubować w 37°C przez 15 minut w ciemności w celu uzyskania koloru;
9) Test: Dodaj 50 µl roztworu zatrzymującego reakcję do każdego dołka.Delikatnie wstrząśnij, aby wymieszać.Ustaw długość fali czytnika mikropłytek na 450 nm, aby określić wartość OD.(Zaleca się odczytanie wartości OD przy podwójnej długości fali 450/630nm w ciągu 5 minut).

7. Ocena wyniku

Istnieją dwie metody oceny wyników;pierwszy to osąd zgrubny, drugi to określenie ilościowe.Należy zauważyć, że wartość OD próbki wykazuje ujemną korelację z zawartością Olaquindoksu.

7.1 Ocena jakościowa
Zakres stężeń (ng/mL) można uzyskać z porównania średniej wartości OD próbki z wartością roztworu wzorcowego.Zakładając, że wartość OD próbkiⅠ wynosi 0,3, a próbkiⅡ wynosi 1,0, podczas gdy wartości roztworów wzorcowych są następujące: 2,243 dla 0 ppb, 1,816 dla 0,2 ppb, 1,415 dla 0,6 ppb, 0,74 dla 1,8 ppb, 0,313 dla 5,4 ppb i 0,155 dla 16,2 ppb, odpowiednio zakres stężeń próbki wynosi od 5,4 do 16,2 ppb, a próbki od 0,6 do 1,8 ppb.

7.2 Oznaczenie ilościowe
Średnie wartości wartości absorbancji są równoważne procentowi średniej wartości OD (B) próbki i roztworu wzorcowego podzielonej przez wartość OD (B0) pierwszego roztworu wzorcowego (0 wzorzec), a następnie pomnożonej przez 100% , to znaczy,

B—średnia (podwójne studzienki) wartość OD próbki lub roztworu wzorcowego
B0 — średnia wartość OD roztworu wzorcowego 0 ng/mL
Narysuj krzywą standardową z procentami absorpcji roztworów wzorcowych i wartościami półlogarytmu roztworów wzorcowych Olaquindox (ng/mL) odpowiednio na osiach Y i X.Odczytaj odpowiednie stężenie próbki z krzywej standardowej, włączając jej procent absorpcji do krzywej standardowej.Otrzymaną wartość mnoży się następnie przez odpowiednią krotność rozcieńczenia, uzyskując ostatecznie stężenie Olaquindoksu w próbce.
Korzystanie z profesjonalnego oprogramowania analitycznego tego zestawu będzie wygodniejsze w przypadku dokładnej i szybkiej analizy dużej ilości próbek.(Prosimy o kontakt w sprawie tego oprogramowania)

8. Środki ostrożności

1. Temperatura pokojowa poniżej 25 ℃ lub temperatura odczynników i próbek, które nie zostaną przywrócone do temperatury pokojowej (20-25 ℃) doprowadzą do niższej standardowej wartości OD
2. Suchości mikropłytki w procesie mycia będą towarzyszyć sytuacje, w tym nieliniowe krzywe wzorcowe i niepożądana odtwarzalność
3. Wymieszaj równomiernie każdy odczynnik i mieszaninę reakcyjną i dokładnie umyj mikropłytkę, w przeciwnym razie wystąpi niepożądana powtarzalność
4. Roztwór zatrzymujący to 2 M roztwór kwasu siarkowego, unikaj kontaktu ze skórą;
5. Włóż niewykorzystaną mikropłytkę do samouszczelniającego się worka, aby ponownie ją zamknąć.Standardowa substancja i bezbarwna substancja barwiąca są wrażliwe na światło, a zatem nie mogą być bezpośrednio wystawione na działanie światła
6. Nie używać zestawu po upływie terminu ważności.Użycie rozcieńczonych lub zafałszowanych odczynników z zestawów spowoduje zmiany czułości i wykrywanych wartości OD.Nie należy wymieniać odczynników z zestawów o różnych numerach serii, które mają być używane
7. Wyrzuć roztwór barwiący o dowolnym kolorze, który wskazuje na degenerację tego roztworu.Wartość wykrywania roztworu wzorcowego 0 mniejsza niż 0,5 wskazuje na jego degenerację
8. Optymalna temperatura reakcji to 37 ℃, a zbyt wysoka lub zbyt niska temperatura spowoduje zmiany czułości wykrywania i wartości OD.

9. Przechowywanie i data ważności

Przechowywanie: przechowywać w temperaturze 2-8 ℃, nie zamrażać.
Termin ważności: 12 miesięcy;data produkcji znajduje się na pudełku.
Uwaga: Jeśli opakowanie próżniowe mikropłytki przecieka, nadal można go używać, nie wpływaj na wynik testu, zrelaksuj się podczas użytkowania.

P1: Kiedy zostanie wysłany?
A1: Wyślemy towar tak szybko, jak to możliwe w ciągu 7 dni roboczych od otrzymania płatności.(W przypadku czynników zewnętrznych, takich jak epidemia, dostawa może się opóźnić)

P2: czy obsługuje OEM/ODM?
A2: Może być obsługiwany, ale określona ilość musi przekraczać 100 000 sztuk, co jest wygodne w przypadku niestandardowych produktów.

P3: Jak radzi sobie twoja fabryka pod względem kontroli jakości?
A3: Posiadamy krajowe certyfikaty ISO9001 i ISO13485.Nasz proces produkcyjny jest zgodny ze standardowymi procedurami, aby zapewnić optymalną jakość produktu.

P4: Jak zapewnić obsługę posprzedażną?
A4: Zapewniamy profesjonalną techniczną obsługę posprzedażną online.Możemy zapewnić Ci indywidualne wskazówki za pośrednictwem wideo, telefonu itp.

P5: Jaka jest metoda płatności?
A5: Otrzymujemy płatność przez T / T.

P6: jak wysłać?
A6: Wybierz najlepszą dla siebie metodę wysyłki, otrzymując oferty od naszych wielu współpracujących przewoźników, a także wysyłaj zgodnie z własnymi wymaganiami.